咨詢電話

18511767098

當(dāng)前位置:首頁  >  新聞中心  >  分享一篇關(guān)于小鼠乳腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)步驟

分享一篇關(guān)于小鼠乳腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)步驟

更新時間:2022-12-23      點(diǎn)擊次數(shù):484
  今天為大家分享一篇關(guān)于小鼠乳腺癌細(xì)胞的培養(yǎng)步驟,話不多說下面一起來了解一下吧。
 
  一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
 
  1)準(zhǔn)備培養(yǎng)基,90%;上等胎牛血清,10%。
 
  2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
 
  3)凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
 
  二.細(xì)胞處理:
 
  1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并檢查細(xì)胞密度。
 
  2)細(xì)胞傳代:小鼠乳腺癌細(xì)胞如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
  對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
 
  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
 
  2.加2ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
 
  3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
 
  4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
  3)細(xì)胞凍存:小鼠乳腺癌細(xì)胞待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
©2025 北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院版權(quán)所有 All Rights Reserved.     備案號:京ICP備12027104號-6

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)     管理登陸     sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 日本加勒比在线 | 国产黄色一级网站 | 久久久欧美综合久久久久 | 欧美成年免费a级 | a级做爰视频免费观看 | 亚洲欧美日韩精品香蕉 | 玖草资源在线 | 亚洲天堂视频在线观看免费 | 亚洲成人偷拍自拍 | 欧美 日韩 国产 成人 在线观看 | 欧美在线1 | 久久黄色影院 | 国产乱码一区二区三区四川人 | 国产免费播放一区二区 | 亚洲人在线 | 国产视频99 | 欧美一级毛片免费高清的 | 亚洲国产精品免费 | 久久亚洲精品永久网站 | 日本一级毛片高清免费观看视频 | 国产精品亚洲第一区柳州莫青 | 亚洲欧美v视色一区二区 | 在线播放亚洲视频 | 美女在线看永久免费网址 | 午夜欧美精品久久久久久久久 | 性做久久久久免费观看 | 红色记忆 | 在线亚洲精品国产波多野结衣 | 国内9l视频自拍 | 中文字幕在线观看日韩 | 亚洲在线免费观看 | 欧美高清亚洲欧美一区h | 老司机久久影院 | 精品 日韩 国产 欧美在线观看 | 亚洲欧美人妖另类激情综合区 | 成年片免费网址网站 | 一区二区三区不卡在线 | 国产亚洲人成网站在线观看不卡 | 一本色道久久综合网 | 怡红院久久 | 91四虎国自产在线播放线 |